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      細(xì)胞轉(zhuǎn)染

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      外源基因進(jìn)入細(xì)胞主要有四種方法:電擊法、磷酸鈣法和脂質(zhì)體介導(dǎo)法和病毒介導(dǎo)法。


      電擊法是在細(xì)胞上短時間暫時性的穿孔讓外源質(zhì)粒進(jìn)入;

      磷酸鈣法和脂質(zhì)體法是利用不同的載體物質(zhì)攜帶質(zhì)粒通過直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因進(jìn)入細(xì)胞;

      病毒法是利用包裝了外源基因的病毒感染細(xì)胞的方法使得其進(jìn)入細(xì)胞。但是由于電擊法和磷酸鈣法的實驗條件控制較嚴(yán)、難度較大;病毒法的前期準(zhǔn)備較復(fù)雜、而且可能對于細(xì)胞有較大影響;

      所以現(xiàn)在對于很多普通細(xì)胞系,一般的瞬時轉(zhuǎn)染方法多采用脂質(zhì)體法。 利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法最重要的就是防止其毒性,因此脂質(zhì)體與質(zhì)粒的比例,細(xì)胞密度以及轉(zhuǎn)染的時間長短和培養(yǎng)基中血清的含量都是影響轉(zhuǎn)染效率的重要問題,通過實驗摸索的合適轉(zhuǎn)染條件對于效率的提高有巨大的作用。

      客戶須知:
      1、客戶提供生民狀況良好的細(xì)胞株,同時提供細(xì)胞特性,培養(yǎng)條件及相關(guān)注意事項;公司也可以為客戶代購細(xì)胞并且提供保種服務(wù);
      2、客戶提供質(zhì)粒,詳細(xì)說明該質(zhì)粒的大小、濃度、抗性、拷貝數(shù)等相關(guān)背景資料;
      3、客戶提供的質(zhì)粒需要有檢測標(biāo)簽如:EGFP或者LacZ等,若沒有則認(rèn)為質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率和對照質(zhì)粒pEGFP-N1的轉(zhuǎn)染效率一致。

      服務(wù)承諾:
      1、提供轉(zhuǎn)染目的質(zhì)粒前后的細(xì)胞培養(yǎng)圖片和熒光圖片;
      2、提供目的質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率和轉(zhuǎn)染方案。
      Genenode|君諾德公司

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