技術(shù)服務(wù)

技術(shù)服務(wù)表單下載：實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)表單 

我們專業(yè)提供qPCR檢測(cè)服務(wù)，技術(shù)精湛，價(jià)格優(yōu)惠，內(nèi)參免費(fèi)，多臺(tái)qPCR儀，檢測(cè)速度30張96孔板/天，一般5-10天出實(shí)驗(yàn)結(jié)果，承接全國(guó)各地訂單，歡迎咨詢！

熒光定量PCR技術(shù)是通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)監(jiān)控反應(yīng)過程。隨著PCR 反應(yīng)的進(jìn)行，反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一次熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，結(jié)合相應(yīng)的軟件對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析，可以得到熒光擴(kuò)增曲線，計(jì)算待測(cè)樣品初始模版的量。

 
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍，運(yùn)用該項(xiàng)技術(shù)，可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行相對(duì)定量、絕對(duì)定量和定性分析。君諾德生物基于多年的經(jīng)驗(yàn)，可以提供mRNA 表達(dá)量水平檢測(cè)、microRNA 表達(dá)量水平檢測(cè)和基因拷貝數(shù)檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)的方法可分為SYBR Green I 法和TaqMan探針法，測(cè)定靈敏、特異性強(qiáng)，易于使用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)流程：

服務(wù)項(xiàng)目：
1．相對(duì)定量：

對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行某一特定基因的檢測(cè)并確定待測(cè)基因相對(duì)于某一特定管家基因以及該基因在實(shí)驗(yàn)組中相對(duì)于對(duì)照組的相對(duì)表達(dá)情況。參考基因和靶基因表達(dá)分析，包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增，采用SYBR Green I法和TaqMan探針法兩種方式，一般采用2－ΔΔ Ct法進(jìn)行計(jì)算。每個(gè)樣本重復(fù)三次，一般情況我公司提供內(nèi)參基因引物。

檢測(cè)服務(wù)包括：mRNA，miRNA，lncRNA，circRNA，端粒長(zhǎng)度檢測(cè)

2．絕對(duì)定量：

對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行某一特定基因的檢測(cè)并確定樣本中基因的拷貝數(shù)。需要制備標(biāo)準(zhǔn)品并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測(cè)目的樣本中的基因，比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到基因準(zhǔn)確拷貝數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)品制備單獨(dú)收費(fèi)。DNA(RNA) 的絕對(duì)定量分析;轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)測(cè)定，病毒和病原量化。

3.  定性分析： 

對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行某一特定基因的檢測(cè)。檢測(cè)病毒，檢測(cè)轉(zhuǎn)基因，確定品種，突變基因分型

4. 單核苷酸多態(tài)性分析(終點(diǎn)法)： 

人類疾病分析;個(gè)性化醫(yī)療;單核苷酸多態(tài)性分析：Taqman-MGB，KASP
 
送樣要求：
1. 樣品要求：細(xì)胞（≥10⁶ ）、組織（≥300mg）、血液（≥1ml）、葉片（≥100mg）等樣品材料，基因組DNA，cDNA不少于30 μg，總RNA（體積≥20μl，濃度≥100 ng/μl）。組織需液氮速凍、細(xì)胞收獲后加入Trizol保存于-80度，樣品用干冰寄送。避免各類污染和反復(fù)凍融。

2. 詳細(xì)填寫技術(shù)服務(wù)表單，根據(jù)客戶所填寫表單信息分析實(shí)驗(yàn)，報(bào)價(jià)和周期；

技術(shù)服務(wù)表單信息包括：

客戶信息：開票信息，聯(lián)系方式等；

靶基因信息：包括基因序列或GenBank Accession Number 等；

背景資料：包括生物物種信息（Human、Mouse、Rat 等）、擴(kuò)增目的基因NCBI登錄號(hào)、DNA/RNA 來(lái)源、相關(guān)文獻(xiàn)等。

 
提交結(jié)果：

完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括擴(kuò)增曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線，溶解曲線，引物和探針及序列，電泳圖，CT值，原始數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)分析結(jié)果等。 

收費(fèi)方式：(全國(guó)范圍誠(chéng)招技術(shù)服務(wù)代理商)

具體服務(wù)價(jià)格，根據(jù)不同qPCR方法，待檢測(cè)樣品數(shù)量，基因數(shù)量決定的，具體請(qǐng)?jiān)儍r(jià)！

mRNA熒光定量檢測(cè)：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時(shí)間
總RNA提取及反轉(zhuǎn)錄	60-120元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
引物設(shè)計(jì)合成篩選	100元/基因	100元/基因	2-5天
內(nèi)參基因	一般免費(fèi)	樣品和基因數(shù)太少內(nèi)參算一個(gè)基因
mRNA表達(dá)量檢測(cè)(三個(gè)重復(fù))	120元/基因	75元/基因/三個(gè)重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

LncRNA熒光定量檢測(cè)：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時(shí)間
總RNA提取及反轉(zhuǎn)錄	60-120元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
引物設(shè)計(jì)合成篩選	100元/基因	100元/基因	2-5天
內(nèi)參基因	一般免費(fèi)	樣品和基因數(shù)太少內(nèi)參算一個(gè)基因
LncRNA表達(dá)量檢測(cè)(三個(gè)重復(fù))	120元/基因	96元/基因/三個(gè)重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

miRNA熒光定量檢測(cè)：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時(shí)間
總RNA提取及反轉(zhuǎn)錄	100-120元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
引物設(shè)計(jì)合成篩選	200元/基因	160元/基因	2-5天
內(nèi)參基因	一般免費(fèi)	樣品和基因數(shù)太少內(nèi)參算一個(gè)基因
mRNA表達(dá)量檢測(cè)(三個(gè)重復(fù))	180元/基因	144元/基因/三個(gè)重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

circRNA熒光定量檢測(cè)：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時(shí)間
總RNA提取及反轉(zhuǎn)錄	60-120元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
引物設(shè)計(jì)合成篩選	200元/基因	160元/基因	2-5天
內(nèi)參基因	一般免費(fèi)	樣品和基因數(shù)太少內(nèi)參算一個(gè)基因
circRNA表達(dá)量檢測(cè)(三個(gè)重復(fù))	200元/基因	160元/基因/三個(gè)重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時(shí)間
基因組DNA提取	20-80元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建	600-800元/標(biāo)準(zhǔn)品/基因	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-5天
引物設(shè)計(jì)合成篩選	100元/基因	100元/基因
絕對(duì)定量檢測(cè)(三個(gè)重復(fù))	60元/基因/三個(gè)重復(fù)	60元/基因/三個(gè)重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

端粒相對(duì)長(zhǎng)度檢測(cè)：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時(shí)間
基因組DNA提取	20-80元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
引物設(shè)計(jì)合成	100元/基因	100元/基因	1-2天
端粒相對(duì)長(zhǎng)度檢測(cè)(三個(gè)重復(fù))	120元/基因/三個(gè)重復(fù)	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

端粒酶活性檢測(cè)：

服務(wù)內(nèi)容	收費(fèi)方式	優(yōu)惠價(jià)	時(shí)間
總RNA提取及反轉(zhuǎn)錄	60-120元/樣品	根據(jù)具體項(xiàng)目報(bào)價(jià)	2-3天
端粒酶引物設(shè)計(jì)合成	100元/基因	100元/基因	2-5天
內(nèi)參基因	一般免費(fèi)	樣品數(shù)太少內(nèi)參算一個(gè)基因
端粒酶活性檢測(cè)(三個(gè)重復(fù))	120元/基因	75元/基因/三個(gè)重復(fù)	1-3天
數(shù)據(jù)整理	免費(fèi)	結(jié)果分析及報(bào)告	1-2天

常用網(wǎng)站：

1. NCBI：https://www.ncbi.nlm.nih.gov

2. DDBJ：https://www.ddbj.nig.ac.jp

3. EMBL-EBI：https://www.ebi.ac.uk

4. UCSC：http://genome.ucsc.edu

5. qPCR Primer Database：https://biodb.swu.edu.cn/qprimerdb

6. The real-time PCR primer and probe database：http://www.rtprimerdb.org

7. PrimerBank：https://pga.mgh.harvard.edu/primerbank 

8. miRBase：http://www.mirbase.org/