技術(shù)服務(wù)

我們采用以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA為骨架的復(fù)制缺陷型重組腺病毒系統(tǒng)，通過對比其他系統(tǒng)（包括Adeasy、Adeno-X、AdMax等系統(tǒng)），對穿梭載體，病毒骨架載體和包裝細(xì)胞系都做了改進，并且在克隆、包裝、擴增、純化、滴度測定等各步條件也做了改進和優(yōu)化，經(jīng)過大量的實驗和重復(fù)驗證工作后，達到了克隆陽性率更高、質(zhì)量更可靠、包裝穩(wěn)定、出毒迅速、滴度高等效果。使得本系統(tǒng)比上述其他系統(tǒng)有了更強大的優(yōu)勢，可提供高品質(zhì)、高產(chǎn)量的重組腺病毒。在此基礎(chǔ)上，還拓展了更廣泛的應(yīng)用，可以提供各種帶報告基因（如GFP、RFP、Luciferase、LacZ等），帶不同標(biāo)簽（如HA、myc、His、Flag等）的腺病毒構(gòu)建和包裝服務(wù)及RNAi重組腺病毒的構(gòu)建和包裝服務(wù)。所包裝的腺病毒已成功應(yīng)用于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，基因轉(zhuǎn)位，Co-IP，動物實驗，干細(xì)胞研究，原代細(xì)胞研究，神經(jīng)細(xì)胞研究等科研實驗。

提供的服務(wù)：
1.表達目的基因的重組腺病毒載體構(gòu)建服務(wù)
2.超大量及超高滴度的重組腺病毒擴增和純化服務(wù)
3.重組腺病毒載體的鑒定
4.shRNA基因沉默效應(yīng)驗證
5.表達shRNA的重組腺病毒載體的構(gòu)建服務(wù)
6.構(gòu)建各種帶不同標(biāo)簽和不同報告基因的腺病毒載體
7.可調(diào)控表達的重組腺病毒載體
8.目的基因的克隆，或者定購

提供的產(chǎn)品：
1.根據(jù)客戶需求構(gòu)建包裝病毒

2.常用對照病毒

我們的承諾：
1.選擇我們的服務(wù)，更加方便、快捷。從載體構(gòu)建、包裝、出毒、擴增、純化到滴度測定共需要45-65個工作日；
2.選擇我們的服務(wù)，可以包裝任何有細(xì)胞毒性作用的基因；保證100%的包裝成功率；
3.選擇我們的服務(wù)，提供高品質(zhì)，高產(chǎn)量的重組腺病毒；
4.選擇我們的服務(wù)，可提供完備的質(zhì)檢報告，包括提供重組穿梭載體的酶切及測序報告、重組腺病毒載體的酶切及測序報告。

技術(shù)優(yōu)勢：
A：載體構(gòu)建周期短，重組腺病毒載體克隆陽性率率高(陽性率>95%)；
B：完整的穿梭載體系統(tǒng)；

C：可包裝有細(xì)胞毒性的基因：在改造過的HEK293（reformed）細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染相同量的受調(diào)控的GFP腺病毒，及不受調(diào)控表達的RFP腺病毒，同一視野下的實驗結(jié)果，在常用穿梭載體列表中所有標(biāo)紅的穿梭載體與我們的病毒骨架載體聯(lián)用，都實現(xiàn)了在改造過的包裝細(xì)胞系HEK293(reformed)中的調(diào)控表達，可實現(xiàn)毒性基因的包裝，不影響該基因在正常細(xì)胞包括正常HEK293細(xì)胞中的表達。
D：包裝成功率達到100%，目前所構(gòu)建的500多個腺病毒載體全部包裝成功。（主要基于對包裝細(xì)胞系的改造及基因在包裝細(xì)胞系的受控表達。其他腺病毒包裝系統(tǒng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)達不到這樣的包裝成功率。）
E：病毒滴度高，純化后可以達到1×1011-2×1011 PFU/ml,體積在2ml左右。（高滴度的實現(xiàn)也是基于對包裝細(xì)胞系的改造，及基因在包裝細(xì)胞系的受控表達）

價格：

項目	周期（工作日）	病毒滴度/總量	報價（元）
構(gòu)建、包裝、擴增、純化	70-80	≥1×1011PFU/ml，2ml	21000元
構(gòu)建、包裝、擴增	50	≥1×1010PFU/ml，5ml	15000元
包裝、擴增、純化	40	≥1×1011PFU/ml，2ml	15000元
包裝、擴增	30	≥1×1010PFU/ml，5ml	7000元
擴增、純化	30	≥1×1011PFU/ml，2ml	12000元
小量擴增	20	≥1×1010PFU/ml，5ml	6000元