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糞便基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)

Stool DNA Extraction Kit(Column)

包裝規(guī)格：

一.產品介紹：
     常規(guī)的DNA純化方式并不能有效地去除糞便中存在的大量抑制因子而導致下游實驗的失敗，如PCR不能擴增出所需片段。該試劑盒采用DNA吸附柱和新型獨特的溶液系統(tǒng)，能有效去除動物糞便中各種影響下游實驗（如PCR）的抑制因子，并能高效地回收糞便中的基因組DNA。動物糞便樣品經特殊緩沖液ASL重懸后，70℃處理5分鐘裂解細菌；離心去除不溶解的雜質，蛋白酶K消化進一步去除蛋白和雜質；然后基因組DNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜， 再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟， 抑制物去除液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除， 最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈基因組DNA從硅基質膜上洗脫。

二.產品特點：
1.離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好?？朔藝a試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
3.快速，簡捷，單個樣品操作一般可在40分鐘內完成。
4.多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達1.7～1.9，可直接用于PCR，Southern-blot和各種酶切反應。

三.適用范圍：
    適用于快速提取各種糞便DNA。

四.儲存條件：
1.緩沖液ASL或者結合液CB低溫時可能出現析出和沉淀，可以在70℃水浴幾分鐘幫助重新充分溶解，恢復澄清透明后冷卻到室溫即可使用。
2.為避免降低活性，方便運輸，提供蛋白酶K為凍干粉狀，收到后，可短暫離心后，加入1毫升滅菌水溶解，因為反復凍融可能會降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分裝凍存，－20℃保存。
3.避免試劑長時間暴露于空氣中產生揮發(fā)、氧化、pH值變化，各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。

五.注意事項：
1.所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉速可以達到13,000rpm的傳統(tǒng)臺式離心機，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機。
2.開始實驗前將需要的水浴先預熱到70℃?zhèn)溆谩?br /> 3.結合液CB 和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物，操作時要戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時，用大量清水或者生理鹽水沖洗。
4.洗脫液EB不含有螯合劑EDTA， 不影響下游酶切、連接等反應。也可以使用水洗脫， 但應該確保pH大于7.5， pH過低影響洗脫效率。用水洗脫DNA應該保存在－20℃。DNA如果需要長期保存，可以用TE緩沖液洗脫（10mM Tris-HCl， 1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影響下游酶切反應，使用時可以適當稀釋。
5.PCR可能被過量的DNA（一般大于1μg）抑制，使用最小用量的洗脫DNA（適當稀釋）反而可以得到更好的擴增。一般加入的洗脫DNA體積不要超過總PCR反應體積的10％。我們建議在PCR反應體系中加入終濃度0.1 μg/μl的BSA（牛血清白蛋白）有助于得到最佳擴增效果。