產(chǎn)品中心

纖維類組織RNA提取試劑盒(離心柱型)

Fibrous tissue RNA Extraction Kit(Column)

包裝規(guī)格：

本產(chǎn)品僅用于科研，禁止用于醫(yī)藥、臨床醫(yī)療、食品和化妝品等用途。

產(chǎn)品介紹：
纖維類組織RNA提取試劑盒，適用于心臟、骨骼肌、血管、氣管、皮膚和其它纖維豐富的組織的RNA提取。可在30分鐘左右，無需使用苯酚、氯仿等有機(jī)試劑，采用獨(dú)特的裂解液可以迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶，結(jié)合多次柱漂洗的方式，可提取沒有蛋白、細(xì)胞代謝物等雜質(zhì)污染的高純度、高質(zhì)量的總RNA。 

可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A篩選、體外翻譯、構(gòu)建cDNA文庫等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
無污染：整套試劑盒采用RNase-Free處理。
特殊性：使用針對纖維豐富組織RNA提取的改良試劑。
易操作：操作簡便，提取過程僅需 30分鐘左右。 
安全性：無需使用苯酚、氯仿等有機(jī)試劑。
吸附柱：含有特異性吸附柱。通過漂洗－離心－洗脫的步驟提取。
高質(zhì)量：有效保證RNA的完整性，回收RNA 效率高，純度高，沒有蛋白和其他雜質(zhì)污染。OD260/OD280的比值可達(dá)1.9~2.2，可用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

操作步驟：（實(shí)驗(yàn)前請先閱讀注意事項(xiàng)） 
樣品處理：
1.量取10~20mg（<30mg）新鮮組織或－80°C凍存組織放入離心管中，加入300μl裂解液RLT（已添加β-巰基乙醇）。使用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理?；蛟谝旱醒心ズ蠹尤牒线m裂解液RLT混勻。必要時(shí)，用帶鈍針頭的一次性 1 ml注射器（配0.9mm針頭）抽打裂解物。
2.吸取590μl RNase-free H2O至勻漿中。加入10μl蛋白酶K，移液器吹打混勻。

提取步驟：
1.55°C水浴10分鐘。室溫下13，000rpm離心5分鐘。會有雜質(zhì)沉淀。
2.將上清液轉(zhuǎn)入新的離心管中，加入0.5倍上清液體積的無水乙醇，立即吹打混勻。（不要吸取、沉淀物和漂浮物。漂浮物可能會黏附在槍頭的外壁，注意不能將其帶入離心管中。）
3.將混合溶液（每次小于700μl，可分兩次加入）轉(zhuǎn)入套有吸附柱RA的離心管中，13,000 rpm離心1分鐘，棄掉廢液。
4.加700μl 去蛋白液RW1，室溫放置30秒，12，000rpm 離心30秒，棄掉廢液。
5.加入500μl漂洗液RW（請先檢查是否已加入無水乙醇），12,000 rpm 離心30秒，棄掉廢液。
6.重復(fù)步驟5一遍。
7.將吸附柱RA放回收集管中，13,000 rpm離心2分鐘，盡量除去漂洗液，以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
8.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的廢液），放入新的RNase-free離心管中，在吸附膜的中間部位加30 ~ 50μl RNase-free H2O室溫靜置1分鐘，12,000 rpm 離心1分鐘。取得RNA后，將RNA溶液保存在－80°C，防止降解。

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